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恒远为您简述SNP培养基测序的两种方法

更新时间:2014-05-23 点击量:1653

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方法一:直接测序法进行SNP分析
在所有SNP的检测方法中,对欲检测片段进行直接扩增、测序是zui为准确的方法。通常情况下,纯合型SNP位点的测序峰为单一峰型,而杂合型SNP位点的测序峰为套峰,因而很容易将其区分开来。通过直接测序方法进行SNP检测的检出率接近100%。
方法二:PCR-SSCP方法
单链构象多态性分析是一种简单、地检测DNA或RNA序列中点突变的技术,由于实验成本较低,也是一种目前较为常用的方法。

★ zui后,上海恒远高质量培养基提醒您,这其中需要注意的问题:
1、PCR-SSCP只能作为一种突变检测方法,要zui后确定突变的位置和类型,还需进一步测序。
2、由于SSCP是依据点突变引起单链DNA分子立体构象的改变来实现电泳分离的,这样就可能会出现当某些位置的点突变对单链DNA分子立体构象的改变不起作用或作用很小时,再加上其他条件的影响,使聚丙烯酰胺凝胶电泳无法分辨造成漏检。
3、经实验证明小于300bp的DNA的片段中的单碱基突变,90%可被SSCP发现。