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酶联免疫的条件与测定方法有什么关系

更新时间:2014-09-17 点击量:1395

    实验要在良好的环境中执行操作,实验的条件也是非常重要的,而针对酶联免疫测定的条件与其测定方法有着一定的关系,今天上海恒远就来和您说说它们之前有什么关系。 
    定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出有或无的简单回答,分别用阳性、阴性表示。 表示该标本在该测定系统中有反应,阴性则为无反应。
    用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
    在间接法和夹心法ELSIA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。
    而酶联免疫试剂盒的回收率与真实成分有紧密的关系,回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,假如作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出尺度数据为0.99毫克/升,就是说您的回收率是99%,这个说明了方法的正确度。  
·空白管阳性高:
  1.样本本身就是阳性样本,换阴性样本做回收率。
  2.空白管在实验中被污染,实验中防止交叉污染。
  3.水质原因用,娃哈哈矿泉水代替。
·假阴、阳性:
  1.水质原因:点复溶液验证,用娃哈哈矿泉水代替;
  2.实验操作原因。吸取到其它相吹干,准确的取液吹干。离心不*,延长离心时间。样本的污染,更换样本乳化未处理*。温浴(70℃)处理乳化现象;
  3.仪器试剂原因。离心管未清洗干净,正确的洗涤器具。有机溶剂的影响,做试剂空白看影响结果;
  4.衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质),更换衍生化试剂;
  5.与曲线好坏相关,保证曲线的正常。
    在从冰箱拿出的标本要预温至室温,对冰冻的样品要融化好,并充分混匀再用。假如忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性。了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。对不能及时检测的标本要妥善保留于4℃冰箱,做好原始记实,标本管上标上待检者姓名、日期。
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