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这些ELISA试剂盒的实验操作禁忌,您触碰到了吗?

更新时间:2018-01-09 点击量:942

  ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。ELISA试剂盒实验虽然具有检测时间短,操作非常简便的优点,但是其实验的结果的影响因素也是有很多,所以实验过程中一定要多加注意。今天,上海恒远生物为大家分享ELISA试剂盒实验的哪些禁忌,希望可以给您的实验带来帮助。

 

实验禁忌:

    1.加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。

    2.作时必须戴手套,穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度。

    3.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

    4.同批号试剂组分不得混用。

    5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

    6.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

    7.要确保微量加样器的准确性,可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定。

    8.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。

    9.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。

    10.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

    11.底物为TMB,避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性,应尽量避免接触皮肤。

 

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