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人半乳凝素3(GAL-3)酶联免疫试剂盒代测

人半乳凝素3(GAL-3)酶联免疫试剂盒代测

简要描述:人半乳凝素3(GAL-3)酶联免疫试剂盒代测用于测定人血清、血浆及相关液体样本中半乳凝素3(GAL-3)含量。

产品型号:

所属分类:人酶联免疫试剂盒

更新时间:2022-08-26

详细说明:

人半乳凝素3(GAL-3)酶联免疫试剂盒代测

检测范围:3.0pg/ml-80pg/ml

 

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中半乳凝素3(GAL-3)含量。

 

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人半乳凝素3(GAL-3)水平。用纯化的人半乳凝
素3(GAL-3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入半乳凝素
3(GAL-3),再与HRP 标记的半乳凝素3(GAL-3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的半乳凝素3(GAL-3)呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人半乳凝素3(GAL-3)浓度。

 

试剂盒组成

 

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×

7

终止液

6ml×

 

 

 

 

 

 

2

酶标试剂

6ml×

8

标准品(32mU/L

0.5ml×

 

 

 

 

 

 

3

酶标包被板

12 ×

9

标准品稀释液

1.5ml×

 

 

 

 

 

 

4

样品稀释液

6ml×

10

说明书

 

 

 

 

 

 

5

显色剂 A 液

6ml×

11

封板膜

 

 

 

 

 

 

6

显色剂 B 液

6ml×1/

12

密封袋

 

 

 

 

 

 

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

操作步骤:

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

 

80pg/ml

号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

40pg/ml

号标准品

150µl  5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

20pg/ml

号标准品

150µl  4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

10pg/ml

号标准品

150µl  3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

5pg/ml

号标准品

150µl  2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

 

 

 

2. 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

操作程序:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。 

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:个月



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