AVP,人精氨酸加压素酶联免疫试剂盒厂家
l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人精氨酸加压素(AVP)的含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人精氨酸加压素(AVP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人精氨酸加压素(AVP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
AVP,人精氨酸加压素酶联免疫试剂盒厂家操作流程(具体请参照说明书)
① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值
常见问题
实验中zui可能出现问题
一、所有孔未显色?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法:
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前,要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。
二、所有孔显色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。
2、洗板不干净。
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。
4、温度没达到要求。
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
解决办法:
1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。
3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。
4、控制孵育温度在25℃。
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。
储存方式
试剂盒在4℃下存放不要冻结,4℃保存,有效期六个月,客户应要求供应商,提供批次试剂盒