人铁调素25(Hepc 25)酶联免疫试剂盒原理
l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人铁调素25(Hepc 25)的含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人铁调素25(Hepc 25)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人铁调素25(Hepc 25)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人铁调素25(Hepc 25)酶联免疫试剂盒原理详细介绍
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产品名称:
产品规格:96T/48T
产品品牌:R&D/TSZ
样品类型:血清、血浆、细胞培养上清等样品类型
检测方法:酶联免疫法
特 异 性:公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性
交叉反应:由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限,现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此,交叉反应可能仍然存在
样 本 量:50-100 μL
实验时间:1–4.5h
储存条件:2-8°C
储存方法:可以存储在2 - 8°C长达1个月(专家建议:4°C恒温保存,酶免试剂盒实验效果更佳)。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋,避免潮湿
有 效 期:6 months
使用优点:ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白,包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。
标本要求
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
*优势:
1.严格的质控体系:所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控,确保试剂盒质量及稳定性;
2.产品经过不断优化,具有很好的灵敏度;
3.综合指标特性,研发便捷操作的试剂盒;
4.*分装:专业的,可靠的实验结果,优秀的产品质量,低廉的市场价格,实惠、经济、可靠。
样品收集、处理及保存方法
(1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
(2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
(3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
(4)组织匀浆-----将组织加入适量shengli盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
(5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
3. 标准品: 加入标准品&标本稀释液1.0ml至冻干标准品中,静置10分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀(浓度为5000 pg/ml)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
4. 生物素化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制 100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
操作注意事项
(1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
(7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
(8)加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
(9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
客户评论
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订购说明:
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