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如何避免抗体的冷冻和融化损伤

更新时间:2015-07-21 点击量:2116

 花大价钱买的抗体如果由于由于保存不当导致抗体坏掉,未免有点得不偿失,如何防止这样的事情发生呢,今天就让上海恒远与您一起来分享一下,防止抗体的冷冻和融化损伤的方法。重复冷冻/融化循环可使抗体变性,导致其形成使抗体结合能力降低的聚集物。

 存于 -20℃ 对于大多数抗体是适当的;保存于 -80℃无明显优势。冰箱不能为无霜型。 这些冷冻和融化之间的循环(以减少结霜)恰恰是应该避免的。出于相同原因,抗体试剂瓶应置于具有zui小温度波动的冰箱区域,例如朝冰箱后部放置而不是置于门架上

有些研究人员加入冷冻保护剂甘油达到 50% 的终浓度以防止冷冻/融化损伤;甘油可将凝固点降低至低于 -20℃。虽然这对于很多抗体是可接受的,但是只有一小部分我们提供的抗体测试了在该保存条件下的稳定性,并且我们的保证仅适用于按数据表上推荐的方式保存的抗体。不建议将包含甘油的溶液保存于 -80℃,因为该温度低于甘油的凝固点。请注意甘油可被细菌污染。如果加入甘油或任何冷冻保护剂,则应当小心操作,以得到无菌制备物。应避免抗体在稀释至工作浓度后在 4℃ 下保存超过一天。蛋白质在高浓度下保存时一般不易降解,理想的浓度为1 mg/ml 或高这是在抗体溶液中加入蛋白质例如 BSA 作为稳定剂的理论基础。加入的蛋白质也有助于减少抗体因结合于容器壁上而造成的损失。对于打算进行偶联的抗体而言,由于稳定蛋白质会与抗体竞争,降低了偶联的效率,所以不应加入稳定蛋白质。

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